human fall:基因工程典型试题分析

1。 2008上海）以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。请回答下列问题：

（1）切割目的基因的方法通常包括_______________和___________________________.

(2)切割和连接DNA分子所使用的酶分别是____________和___________________________.

(3)运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或__________,后者的形状成_________.

(4)由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率___,所以在转化后通常需要进行_____操作.

(5)将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌,从两值得中生产的胰岛素在功能和__________序列上是相同的.

分析：基因工程中，获得目的基因的方法常用的是酶切法和人工合成法，前者是用限制性内切酶从生物材料的细胞或染色体中分离出来，后者是根据已知的蛋白质肽链，人工合成目的基因。切割DNA分子的酶是限制酶，连接DNA分子的酶是DNA连接并，运送目的基因的载体是病毒或细菌的质粒，后者是一段小型的环状的DNA分子。目前的技术条件下，将重组DNA分子导入宏观世界体细胞的成功率还比较低，所以转化后要筛选。将某一基因导入不同的受体细胞，所表达的蛋白质结构取决于基因，而不取决于受体细胞，所以蛋白质的功能和氨基酸序列应该相同。此题好是主要考查基因工程的基本步骤。

2．（2007天津理综）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因常作为标记基因，只有在含有卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程：（图略）请据图回答：

（1）A过程需要的酶有_________________________________________.

(2)B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是______________________.

(3)C过程的培养基除含有必要营养物质\琼脂和激素外,还必须加入______________________.

(4)如果利用DNA分子杂交原理对再生植株检测,D过程应该用___________________________作探针.

(5)科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律.

①将转基因植株与_____________杂交,其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1:1.

②若该转基因植株自交,则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为_________.

③若将该转基因植株的花粉在卡那霉素培养基上离体培养,则获得的再生植株中抗卡那霉素型植株占____%.

分析:学生中感到难做的是后三问,这说明一部分人对筛选的原理不明白,对目的基因的检测方法不清楚,对转基因植株的遗传有模糊认识,转基因植物一般可看作为杂合子,因为转入一个基因就很不容易.

3。（2007山东理综）继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：

（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是_____________________________.

(2)进行基因转移时,通常要将外源基因转入____________中,原因是____________________________.

(3)通常采用___________________技术检测外是否插入了小鼠的基因组.

(4)在研制膀胱生物反应器时,应使外源基因在小鼠的_____________细胞中特异表达.

(5)为使外源基因在后代长期保存,可将转基因小鼠体细胞的__________转入____________细胞中构成重组细胞,使其发育成与供体具有相同性状的个体.该技术称为___________________________.

分析:此题具有鲜明的时代气息,有很强的现实意义，也较好的考查了学生的基本知识与灵活运用知识的能力，是一道路不可多得的好题，具有一定的导向性。对于转基因动物来说，基因导入的方法一般是显微注射法，不同于微生物与植物的基因导入法，并且导入的细胞是受精卵或早期的胚胎细胞，原因是只有受精卵才具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞中表达。而其它的动物细胞是不具有全能性，这也不同于植物。目的基因是否导入的检测方法要用到DNA分子杂交技术，即核酸探针技术。要使外源基因在膀胱上皮细胞中成功表达，只有这样才可以在尿液中分离出人的生长激素，将基因导入到膀胱上皮细胞的目的就是为了便于分离产品，这与乳腺反应器的原理同出一辙。转基因动物的死亡便会使转入的外源基因只能在短时间内发挥作用，转基因的巨大投入就不能得到相应的回报，因此必须使转基因哺乳动物长期生存下去，并保持原有的性状。这必须借助于动物的克隆技术，将转基因小鼠的体细胞核转入到去核的卵细胞质中构成重组细胞并将重组细胞培育成个体。虽然目前人们无法做到这一点，但这是将来科研的方向，这也体现转基因技术的巨大科研价值。

4。（2008山东理综）为了扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐盐水稻新品系。

（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的____处,DNA连接作用于____处.

(2)将重组DNA分子导入到水稻受体细胞的常用方法是有农杆菌转化法和_____________法.

(3)由导入目的基因的水稻细胞培育成植株需要利用_______________技术.该技术的核心是___________和____________.

(4)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功,既要利用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交检测,又要用_________方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性.

分析：此题目与上题有异曲同功之妙。第一问是基础知识，考查工具酶的作用部位。

第二问考查目的基因的导入方法，对于植物细胞一般用土壤农杆菌转染法，这是因为土壤农杆菌易感染植物细胞，从而将外源基因导入到植物体内，还有一种常用方法是基因枪（花汾管通道），不同于动物的显微注射法。第三问考查将植物细胞培育成植株的知识，即组织培养技术，它的核心是脱分化和再分化，这一问也不难，属于基础内容。第四问是对转入基因是否导入成功和转入基因是否成功表达的检测，对于目的基因的检测一般要用DNA探针技术，所用的探针必须用目的基因制成，是否具有耐盐性状要对水稻用一定浓度盐水浇灌或将水稻移栽到盐碱地中，这与抗虫棉是否具有抗虫性状必须看棉铃虫吃食棉叶后是否死亡才能说明一样。