来源：百度文库 编辑：偶看新闻 时间：2024/05/06 18:41:19
一、PH对酶活性影响的实验
（1）不能用碘液作指示剂
常正良 只有在中性和酸性条件下，碘才能使淀粉变蓝，而在碱性条件下，碘不会使淀粉变蓝。事实上，淀粉与碘的蓝色反应在pH=3～5的弱酸性溶液中进行最灵敏，在pH<8的弱碱性溶液中次之，在强酸性溶液中，反应呈现蓝紫色，在pH>9的碱性溶液中不显色。
王建光 本实验不能用碘液作鉴定试剂，因为I2不能长时间留在碱液中，I2会与NaOH发生化学反应，很快生成NaI（碘化钠）和NaIO（次碘酸钠），使I2与淀粉生成蓝紫色络合物的机会大大减少，从而影响实验的观察效果。
（2）不能用斐林试剂作指示剂
王学宏 盐酸会与斐林试剂发生中和反应，使斐林试剂失去鉴定作用。即使酸性条件下淀粉酶仍具有活性，使淀粉水解成还原糖，也不能通过斐林试剂检验出来。
（3）建议改用过氧化氢酶进行此实验
王学宏 综上所述，该实验既不能用碘液作鉴定试剂，也不可用斐林试剂作鉴定试剂。而要探究PH值对酶活性的影响，只能改变反应底物和酶，因此新课标建议改用过氧化氢酶催化过氧化氢的分解来完成此实验，这样就回避了鉴定试剂的选择问题。
二、验证酶化学本质的实验
（1）酸碱水解，产物为氨基酸。
（2）使蛋白质变性的条件如：强酸、强碱、高温等可使酶失活、沉淀。
（3）具有和蛋白质相同的胶体性质。
（4）与双缩脲和硝酸等试剂发生颜色反应。5)电泳实验和元素分析等。
以上各种实验均可用于证明酶的化学本质是蛋白质，但是忽视了一个问题。20世纪80年代以来美国科学家切赫和奥特曼发现了少数RNA也具有催化能力。因此应补充验证RNA酶本质的实验，如用吡罗红来检验。
三、酶的专一性实验
如果选用碘液，只能说明淀粉酶对淀粉起催化作用，不能说明淀粉酶对蔗糖不起作用。故只能选用斐林试剂。
四、温度对酶活性影响的实验
彭邦凤：在“温度对酶活性的影响”实验中，为何选择碘液，而不选择斐林试剂呢？
如果仅从检测反应是否进行的角度来选择，两种试剂均可。就教材三个温度而言，选择斐林试剂进行鉴定，可以看到条件为0℃的试管中生成砖红色沉淀极少，条件为100℃的试管中无砖红色沉淀生成，条件为60℃的试管中砖红色沉淀生成较多，得出结论，酶的作用需要适宜温度。至于常老师提出的，随温度升高，酶活性恢复的问题应该不会出现，由于所加斐林试剂碱性较强，会导致淀粉酶变性失活，鉴定过程中反应不会进行；同时，即便是有少许还原糖生成，也并不影响实验结论的得出，甚至还能更好地说明温度对酶活性的影响——低温降低酶活性，随温度升高酶活性增强，高温导致酶失活，酶的作用需要适宜的温度。
既然如此，为什么实验仍不选择斐林试剂呢？笔者认为，弄清这一点才是解释指示剂选择的本质。选择碘液不仅仅在于证明反应能不能进行，而在于进行的程度，是要证明是否仍有淀粉存在、存在多少（即反应了多少）。为此，正如常老师所说，我让学生对实验进行了改进，部分学生将碘液提前到第二步加入后进行处理，通过预期实验结果，通过讨论大家认为结果为选用碘液除可确定反应是否进行外，还可以动态观察现象变化（其间可能呈现红褐色或红棕色），选择斐林试剂的化学性质的特殊性（碱性）和使用条件的特定性（沸水浴，属鉴定反应是否进行）而达不到这个目的。值得一提的是，讨论中也有同学所提到了100 ℃（沸水中）的条件下，淀粉遇碘并不变蓝的问题，当时还提出了改进意见，将温度适度调低以避免这一点，但在写作时为了尊重教材我仍写了100℃，以至于忽视了在100 ℃（沸水中）的条件下淀粉遇碘不变蓝的事实。
偶看新闻