黑魂3巨人尤姆洋葱死了:【引用】基因工程检测题

一 选择题

1．基因工程中，切割目的基因和载体所用的限制酶及切口必备的特点是(    )

①一个表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子

③终止子的作用是使转录在所需要的地方停止

④所有基因表达载体的构建是完全相同的

A．②③      B．①④      C．①②      D．③④

A．切断a处的酶为限制性内切酶    B．连接a处的酶为DNA连接酶

C．切断b处的酶为DNA解旋酶      D．连接b处的酶为RNA聚合酶

A．动物的受精卵    B．人的神经细胞  C．大肠杆菌细胞  D．酵母菌细胞

5． 以下是几种不同限制性核酸内切酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列的叙述中，错误的是（   ）

6．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是(    )

A．人工合成基因               B．目的基因与运载体结合

C

A．蛋白质工程能定向地改造蛋白质分子的结构，使之更加符合人类需要

B．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构

D．作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因

9．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是(    )

A．人工合成基因               B．目的基因与运载体结合

C

C．选用的细菌为重组质粒受体细胞，是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快

11．（15分）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答：

⑵要把重组质粒导入土壤农杆菌，首先必须用         处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为            态；然后将                            在缓冲液中混合培养完成转化过程。

⑶含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后，将离体棉花叶片组织培养成再生植株要经过和。如要确保再生植株中含有抗虫基因，可在C过程的培养基中加入              。

⑷如想利用分子杂交技术检测再生植株中的抗虫基因是否转录，应该用放射性同位素标记的目的基因作为探针与__________杂交。

12．（15分）基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。“基因敲除细胞”的构建过程如下：

第一步：从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞（ES），在培养基中扩增。这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”。

第二步：构建基因表达载体。取与靶基因序列同源的目的基因（同源臂），在同源臂上接入新霉素抵抗基因等。由于同源臂与靶基因的DNA正好配对，所以能像“准星”一样， 将表达载体准确地带到靶基因的位置。

第三步：将表达载体导入胚胎干细胞，并与其内靶基因同源重组，完成胚胎干细胞的基因改造。

第四步：基因改造后的胚胎干细胞增殖、筛选。

基本原理如下图所示。

⑴在把与靶基因序列同源的目的基因导入受体细胞前，应首先完成               ，在这过程中所需要的工具酶是                    。

⑵启动子的化学成分是        ，它位于基因的首端，是        识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出 mRNA 。

⑶如果要获得一只含目的基因的小鼠，则选择的受体细胞通常是               ，原因是                    。一般可采用         技术将目的基因导入受体细胞。若用大肠杆菌储存目的基因，则需先将其处理为            细胞。

⑷上述资料中新霉素抵抗基因的作用最可能是                             。

⑸⑶中获得的小鼠，通过有性生殖产生的后代是否都含该目的基因？为什么?

        ，                                                             。

⑹该项技术具有广阔的应用前景，请试举一例                               。

一 选择题

1．下图为DNA分子的某一片段，其中①、②、③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是(    )

2．科学家已能运用基因工程技术，让羊合成并由乳腺分泌抗体。下列相关叙述中，正确的是（  ）

①该技术将导致定向变异

③蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供资料

④受精卵是理想的受体细胞

A．①②③④      B．①③④      C．②③④    D．①②④

3．在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是(     )

①基因工程是人工进行基因重组的技术，是在分子水平上对生物遗传作人为干预

④DNA探针可用于病毒性肝炎的诊断、遗传性疾病的诊断、改造变异的基因、检测饮用水病毒含量

5．下列关于生物工程的相关知识，叙述正确的是    (    )

A．在基因工程操作中为了获得重组质粒，必须用相同的限制酶，露出黏性末端可以不相同

B．若要生产转基因抗病水稻，可将目的基因先导入到大肠杆菌中，再转入水稻细胞中

C．植物体细胞杂交，能克服远缘杂交不亲和的障碍，培育出的新品种一定不是单倍体

6．转基因作物（GMC )是通过转基因对农作物进行精确的改造而产生的，转基因作物一方面在产量、抗逆性及品质等方面  有显著改进，极大地降低农业生产成本，另一方面，科学家通过动物实验发现转基因作物可能对人类健康存在着危害。2000年2月27日，英国首相布莱尔为此发表了一篇文章，文中说：“毫无疑问，转基因作物对人类健康和环境有可能带来危害，保护公众和环境的安全，现在是，将来也是政府的首要任务。但与此同时，这种新的科技成果将给人类带来更多的利益，这也是毋庸置疑的。”就以上材料你以为下列说法欠妥的是（     ）

A．转基因技术应用的基本原理是基因重组，转基因作物是转基因技术的一种产物

B．如果转基因作物产生了对人类健康及环境的负面影响，我们应该反思转基因技术

C．科学家必须在现有知识与技术的基础上尽量考虑转基因作物可能存在的风险及采取相应的防范措施

D．国家必须对转基因作物的研究制定相应的法律法规，并进行严格管理与有效控制

7．科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。下图是转基因抗冻番茄的培育过程示意图。下列相关的说法中，不正确的是（  ）

A．若图中Ⅱ是科学家构建的鱼抗冻蛋白基因的表达载体，它通常应包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等

B．科学家常采用显微注射技术的方法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内

C．在转基因番茄食用过程中，可能会出现过敏反应、影响人体正常的代谢、出现滞后效应等安全问题

D．多聚半乳糖醛酸酶(PG酶)可将成熟的番茄果实细胞壁中的多聚半乳糖醛酸降解为半乳糖醛酸，从而导致果实软化。抑制PG酶的活性可以延长番茄果实储藏期，则采用蛋白质工程技术降低该酶活性的一般过程： PG酶蛋白的功能分析→PG酶蛋白的结构预测和设计→PG酶基因的改造

8．下图是获得抗虫棉的技术流程示意图。卡那霉素抗性基因常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下列叙述正确的是 (  )

C．卡那霉素抗性基因中有该过程所利用的限制性内切酶的识别位点

9．下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，有关的叙述中错误的是（   ）

A．基因工程的核心是基因表达载体的构建

B．可以利用人的皮肤细胞来完成①过程

C．过程②必需的酶是逆转录酶，过程③必需的酶是解旋酶

D．在利用AB获得C的过程中，必须用同一种限制性内切酶切割A和B，使它们产生相同的黏性末端

10． 菊花的紫花和白花性状是由一对等位基因控制的，紫色（R）对白色（r）显性。现已克隆到控制紫色的基因R，如果你打算利用上述材料开展研究，那么下表选项中，合理的是(     )

11．（15分）科学家通过基因工程，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入到普通棉株细胞内，并成功的实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株──抗虫棉。其过程大致如下图所示：

(1)基因工程的操作程序主要包括四个步骤，其核心是                        。

(2)获取Bt毒蛋白基因的方法一般有                、              等。

(3)Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用了T-DNA的                                   特点。Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为             。

(4)将目的基因导入受体细胞的方法很多，在该题中涉及到的方法是              。

(5)一个基因表达载体的组成必须有                                 等。

(6)目的基因能否在棉花植株体内维持和表达其遗传特性的关键是                 。这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是                     。
若从个体水平来任何检测？                                             。

12．（15分）利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺反应器技术。2005年我省青岛“崂山奶山羊乳腺生物反应器的研制”项目通过鉴定，该项目生产的药用蛋白具有表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点，可产生乙肝表面抗原及抗凝血酶Ⅲ等医药产品，造福人类健康。下图为利用生物技术获得生物这一新品种和抗虫棉的过程，据图回答：

⑴在基因工程中，A表示              ，如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因，①过程使用的酶区别于其他酶的特点是                           ，B表示         。

⑵在研究过程中，研究人员首先从相关基因组中获取了目的基因，并采用技术对目的基因进行了扩增，然后将目的基因与质粒等载体组合形成了重组载体。在重组载体的构建过程中需要的工具酶有______________。

⑶基因表达载体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括哪几部分。

⑷将目的基因导入受体细胞的过程中，在③过程中一般是采用               方法，在②过程中一般采用               方法，受体细胞一般是                  。

⑸由于转基因表达产物存在于山羊的乳汁中，检测其体内是否出现药用蛋白，在分子水平上的检测方法及结果是什么。

【参考答案】

1．C  解析：目的基因和载体需要用同一种限制性内切酶切割，露出相同的黏性末端两者才能连接在一起。

2．A  解析：基因表达载体的构建是基因工程的核心内容。一个表达载体的组成，除了目的基因外，还有启动子、终止子和标记基因等。启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束。

3．D  解析：DNA解旋酶作用的部位是碱基对之间的氢键，限制性内切酶切割DNA分子的部位的是磷酸二脂键从而露出黏性末端或平末端，而DNA连接酶是通过磷酸二脂键连接起来，RNA聚合酶是把核糖核苷酸连接起来，作用的部位也是磷酸二脂键。

4．B  解析：动植物的受精卵均可以作为基因工程的受体细胞，以培育成转基因动物。大肠杆菌细胞和酵母菌细胞是人们最常用的受体细胞之一，它们具有很强的繁殖能力，是利用微生物来生产某些药品的良好实验材料。人的神经细胞高度分化，已失去了分裂能力，作为基因工程的受体细胞已经没有任何意义。

5．B  解析：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且在特定的切点上切割DNA分子。由此可知，以上DNA片段是由4种限制酶切割后产生的。按照碱基互补配对原则，用的DNA连接酶连接起来的相应片段是②和④，作用的部位是磷酸二酯键。

6．C 解析：人工合成目的基因时， DNA的单链与互补链之间发生碱基互补配对；目的基因与运载体结合时黏性末端的碱基互补配对；目的基因的检测是利用DNA分子杂交的原理(即碱基互补配对原则)，表达中DNA的转录和翻译均有碱基互补配对；只有目的基因导入受体细胞时不经过碱基互补配对。

7．B  解析：蛋白质工程是对基因进行修饰或基因合成，对现有的蛋白质进行改造，或产生新的蛋白质。

8．D  解析：质粒是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。质粒DNA分子上有一个至多个限制酶切割位点和一些特殊的遗传标记基因。在进行基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行人工改造的。

9．C 解析：人工合成目的基因时， DNA的单链与互补链之间发生碱基互补配对；目的基因与运载体结合时黏性末端的碱基互补配对；目的基因的检测是利用DNA分子杂交的原理(即碱基互补配对原则)，表达中DNA的转录和翻译均有碱基互补配对；只有目的基因导入受体细胞时不经过碱基互补配对。

10．C  解析：基因工程的工具酶有限制酶、DNA连接酶；其中，限制酶具有专一性，即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。基因工程中，将目的基因导入受体细胞的工具是运载体，其中最常用的运载体是质粒。目的基因导入受体细胞后，还需要检测后才能知道是否成功表达。

11．⑴ (同一种)限制酶、DNA连接酶(缺一不可)  ⑵感受  将重组质粒和感受态细胞 ⑶脱分化  再分化 卡那霉素 ⑷mRNA

解析：基因表达载体的构建中，需用同一种限制酶切割目的基因和质粒；用DNA连接酶把目的基因和运载体质粒连接成重组质粒。将其导入土壤农杆菌时，首先用处理土壤农杆菌细胞，使其转变为一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态──感受态细胞；其次，将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。获得含有目的基因的植株后，一般采用植物组织培养的方法让其在短时间内大量增殖；若检测，则放在含有卡那霉素的选择培养基上进行选择培养。若利用DNA杂交技术检测再生植株中的抗虫基因是否转录，一般带有标记的基因做探针与m RNA杂交，如果显示出杂交带，则表明目的基因转录除了mRNA。

⑴表达载体的构建(2分)      限制酶和DNA连接酶(2分)   ⑵⑶受精卵   动物受精卵具有全能性（动物不能象植物那样，利用一个除受精卵以外的独立的体细胞直接培养成完整的个体）(2分) 显微注射技术    感受态⑷作为标记基因，便于筛选  ⑸否   在形成生殖细胞时等位基因（目的基因和靶基因）会发生分离⑹基因治疗、动植物改良、利用动植物生产药物等

解析：基因工程中的工具有限制酶、DNA连接酶和运载体等。基因表达载体的构建是基因工程的核心内容，它至少包括启动子、终止子、目的基因和标记基因等。其中，启动子是一段有特殊结构的饿DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA；而新霉素抵抗基因最可能是标记基因。因为动物的受精卵具有全能性，所以一般选受精卵作为转基因动物的受体细胞；而显微注射技术是转基因动物中采用最常用、最有效的一种方法。若将目的基因导入微生物细胞，首先用钙离子处理让细胞变成感受态细胞。转基因动物通过有性生殖产生的后代往往不含有的目的基因，因为在形成生殖细胞时等位基因（目的基因和靶基因）会发生分离。转基因技术具有广阔的应用前景，如基因治疗、动植物改良、利用动植物生产药物等。

1．C  解析：主要考查了三种酶作用的部位。使氢键断裂的是解旋酶，限制性内切酶将相邻两个碱基的磷酸二酯键断裂，连接DNA片段间磷酸二酯键的是DNA连接酶。

2．B  解析：在动物基因工程中，受精卵是最理想的受体细胞。DNA连接酶把目的基因与运载体黏性末端连接起来，形成的是磷酸二脂键，不是碱基对之间的氢键。

3．B  解析:人工合成目的基因有两种方法：一是通过mRNA→单链 DNA→双链DNA；二是根据蛋白质氨基酸序列→mRNA序列→推测出结构基因核苷酸序列→通过化学方法人工合成目的基因。在已知基因碱基序列的情况下，合成目的基因的最佳方法就是以4种脱氧核苷酸为原料，进行化学合成(第二种方法)。

4． B 解析：基因工程的优点是能定向地改变生物的性状，突破了物种之间的生理隔离界限。利用DNA分子杂交技术，以DNA分子做探针可用于检测某些遗传性疾病、饮用水中某些病毒的存在等。

5．C解析：要将目的基因导入水稻体内获得转基因水稻可用农杆茵转化法、基因枪法等，不能用大肠杆菌转化，因大肠杆菌只寄生在动物体内。不舍浸染水稻。植物体细胞杂交得到的新品种细胞内染色体组数目，是进行杂交的两种细胞的染色体组数目之和，至少是二

6．B  解析：目前科学家对基因的结构、基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解得相当有限；再加上转移的基因虽然是功能已知的基因，但不少却是异种生物的基因；同时，由于外源基因插入宿主细胞基因组的部位往往是随机的，因此在转基因生物中，有时候会出现一些难以预料的后果。所以，对转基因作物应该考虑到其对人体健康及环境的负面影响。

7．B  解析：一个完整的基因表达载体，通常包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等。若将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内，通常采用农杆菌转化法，还可以采用花粉管通道法和基因枪法等。在转基因番茄食用过程中，可能会出现如影响人的免疫系统，进而影响人体的健康、过敏反应、会影响人体正常的代谢、担心营养成分改变、担心出现滞后效应等安全问题。采用蛋白质工程技术降低PG酶活性的一般过程： PG酶蛋白的功能分析→PG酶蛋白的结构预测和设计→PG酶基因的改造。

8．A  解析：质粒与目的基因结合时需要用同一种限制性内切酶切割，用DNA连接酶连接；愈伤组织由相同细胞分裂形成，分化后产生相同基因型的植株；卡那霉素抗性基因作为标记基因不能有限制性内切酶的切割位点；抗虫棉有性生殖后代可能会发生性状分离，抗虫性状不一定能稳定遗传。

9．B  解析：基因工程的基本过程可以概括为“四步曲”：即获取目的基因、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定，其中基因表达载体的构建是其核心内容。在其过程中，不能利用人的皮肤细胞来完成①过程，因为皮肤细胞中的胰岛素基因未表达（或未转录），不能形成胰岛素mRNA。过程②必需的酶是逆转录酶，过程③必需的酶是解旋酶。在利用AB获得C的过程中，必须用同一种限制性内切酶切割A和B，使它们产生相同的黏性末端，再加入DNA连接酶才可形成C。

10此题考查基因工程及遗传方案。关键是理解生物性状与某一蛋白的关系，植物组织培养在育种中的优缺点。已知白花为隐性性状，则A为测交实验，可判断杂交个体的基因型；利用基因工程将R基因导入其他生物内就可以控制相关性状一一紫花的出现；紫花性状并不一定是紫色蛋白体现的；植物体细胞组织培养属于无性繁殖,并不改变遗传物质的组成。

11．(1)基因表达载体的构建（2分） (2) 从基因文库中获取目的基因、利用PCR技术扩增目的基因 、通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成等（任意两个均可）  ⑶可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA分子上（2分）  转化 (4)农杆菌转化法（2分） (5)启动子、终止子、目的基因和标记基因 （四者缺一不可）（2分）(6)目的基因是否插入了受体细胞的染色体DNA分子上  DNA分子杂交技术  抗虫的接种实验（2分）

解析：主要考查了基因工程的四个步骤。熟练记住和理解有关知识是解好此题的关键，特别是加强对农杆菌转化法的原理、目的基因检测与鉴定的四种方法的理解。基因工程一般包括四步基本操作步骤，其中基因表达载体的构建是基因工程的核心。一个基因表达载体的组成必须有启动子、终止子、标记基因和目的基因。获取目的基因的方法有三种：从基因文库中获取目的基因、利用PCR技术扩增目的基因 、通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成等。将目的基因导入受体细胞的过程，称为转化。将目的基因导入植物细胞一般采用农杆菌转化法，还有基因枪法、花粉管通道法等，农杆菌转化法是利用了Ti可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA分子上的特点。目的基因是否插入了受体细胞的染色体DNA分子上，是目的基因在棉花植株内维持和表达其遗传特性的关键。检测的方法有两类，一是从分子水平通过DNA分子杂交技术或抗原—抗体杂交技术进行鉴定，二是从个体水平通过抗虫的接种实验来进行检测。

12．⑴目的基因    一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且在特定的位点上切割DNA分子（2分）  重组DNA  ⑵PCR（聚合酶链式反应）  限制酶、DNA连接酶 ⑶一个完整的基因表达载体至少包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等（2分）⑷农杆菌转化法  显微注射技术(2分)  受精卵 ⑸从转基因羊的乳汁中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原—抗体杂交（2分）  如果出现杂交带，表明奶牛中出现了抗原蛋白；如果不出现杂交带，表明奶牛中未出现抗原蛋白（2分）

解析：主要考查了基因工程的工具和操作步骤。限制酶具有特异性，即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且在特定的位点上切割DNA分子。经限制酶切割后露出黏性末端或平末端，而DNA连接酶则能把目的基因和运载体连接起来构成重组DNA。一个完整的基因表达载体至少包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等部分。将目的基因导入受体细胞的过程中，受体细胞若是植物细胞可以农杆菌转化法、花粉通道法和基因枪法；若是动物细胞一般用显微注射技术。目的基因的检测与表达的方法有四种，蛋白质的鉴定一般采用抗原—抗体检测。