偶看新闻参茸三肾胶囊的价格:[转载]染液
来源：百度文库 编辑：偶看新闻 时间：2024/05/09 10:10:49
关于染液的配制
在网上找了很多关于染液的资料（包括染液的配制和染色方法）
一：姬姆萨（Giemsa’s stain；天青-伊红）染液：
1配制：
姬姆萨染料（粉末） 0.5g或7.5g
甲醇（AR） 33ml 或500ml
甘油（AR） 33ml或 500ml
先将姬姆萨染料放入乳钵中，逐渐倒甘油研磨溶于甘油中，置于56℃水温箱内，90～120分钟，然后加入甲醇，摇匀后放置数天，过滤后或不过滤即可使用。此染液放置室温阴暗处，时间越长越好。
使用染液可临时配置）：姬姆萨染液1ml，加DDH2O10ml混匀。即可使用。
2．染色步骤：
（1）先用甲醇固定2～3分钟。
（2）将血或骨髓涂片放置姬姆萨使用液15～30分钟。
（3）涂片用自来水冲洗，在室温中干燥待查。
二．关于瑞氏-吉姆萨染液在网上有两种配制方法和使用方法：
●第一种不用额外配制染液，只需有两种染液即可完成复合染色。
方法：
1.先用瑞氏染液将涂膜面充分覆盖；
2.稍等片刻再加姬姆萨染液2-3滴加减(根据涂片上细胞多少及增升程度酌情而定)；
3.稍等1-2分钟后,再加磷酸盐缓冲液,加时应缓慢地一滴一滴加在涂片膜上,直至膜面上染色液形成表面张力而终止染色液加入；
4.染色30-40分钟；
5.分色：用自来水缓缓冲洗至少3分钟以上,待干，勿用滤纸吸干,以免滤纸纤维污染涂片。
●第二种方法需要配制瑞氏-吉姆萨染液
1、试剂配制：
原料:A:瑞氏染粉0.38克；吉姆萨染粉.0.03克
甲醇100ml
磷酸盐缓冲液；
磷酸二氢钾 0.3g
磷酸氢二钠 0.2g 蒸馏水加至1000ml
配法：将A放入研钵中，加入少量B研磨，再加入少量B磨，再加入少量B磨……倒出，将未溶部分，继续加入B磨……>全溶，加入C，或中间加入C 亦可。
2、染色步骤：
滴数滴入玻片盖满标本，30秒，再加入双蒸水或PBS2-3倍染1-3分中，倾去染液，水洗……封片。
因为没有自己配制染液的经验，而买现成的瑞吉染液又太贵，所以被这些资料弄的晕头转向，所以一一进行了验证。
首先是完成吉姆萨母液的配制（瑞氏染液我们医院有），然后就是按照上文所说的进行复合染色。
接下来配制吉瑞复合染液，按照文中的说法进行染色。
使用两种染液先后复合染色效果比使用吉瑞复合染液染色的效果好。另单独使用吉姆萨染色，必须先用甲醇固定，否则用蒸馏水冲洗之后你会得到一张干净的玻片。
附：
磷酸盐缓冲液的配制
试剂： NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O
配制方法：配制时，常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
（1）0.2mol/L的 Na2HPO4；称取NaH2PO4.2H2O 31.2g(或 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
（2）0.2mol/L的 Na2HPO4：称取Na2HPO4.12H2O 71.632g（或 Na2HPO4·7H2O 53.6g或Na2HPO4·2H2O 35.6g）加重蒸水至1000ml溶解。
（3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.4～7.5）。若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。
0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7～8.0）
pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml) 0.2mol/L Na2HPO4(ml)
5.7 93.5 6.5
5.8 92.0 8.0
5.9 90.0 10.0
6.0 87.7 12.3
6.1 85.0 15.0
6.2 81.5 18.5
6.3 77.5 22.5
6.4 73.5 26.5
6.5 68.5 31.5
6.6 62.5 37.5
6.7 56.5 43.5
6.8 51.0 49.0
6.9 45.0 55.0
7.0 39.0 61.0
7.1 33.0 67.0
7.2 28.0 72.0
7.3 23.0 67.0
7.4 19.0 81.0
7.5 16.0 84.0
7.6 13.0 87.0
7.7 10.5 89.5
7.8 8.5 91.5
7.9 7.0 93.0
8.0 5.3 94.7
在网上找了很多关于染液的资料（包括染液的配制和染色方法）
一：姬姆萨（Giemsa’s stain；天青-伊红）染液：
1配制：
姬姆萨染料（粉末） 0.5g或7.5g
甲醇（AR） 33ml 或500ml
甘油（AR） 33ml或 500ml
先将姬姆萨染料放入乳钵中，逐渐倒甘油研磨溶于甘油中，置于56℃水温箱内，90～120分钟，然后加入甲醇，摇匀后放置数天，过滤后或不过滤即可使用。此染液放置室温阴暗处，时间越长越好。
使用染液可临时配置）：姬姆萨染液1ml，加DDH2O10ml混匀。即可使用。
2．染色步骤：
（1）先用甲醇固定2～3分钟。
（2）将血或骨髓涂片放置姬姆萨使用液15～30分钟。
（3）涂片用自来水冲洗，在室温中干燥待查。
二．关于瑞氏-吉姆萨染液在网上有两种配制方法和使用方法：
●第一种不用额外配制染液，只需有两种染液即可完成复合染色。
方法：
1.先用瑞氏染液将涂膜面充分覆盖；
2.稍等片刻再加姬姆萨染液2-3滴加减(根据涂片上细胞多少及增升程度酌情而定)；
3.稍等1-2分钟后,再加磷酸盐缓冲液,加时应缓慢地一滴一滴加在涂片膜上,直至膜面上染色液形成表面张力而终止染色液加入；
4.染色30-40分钟；
5.分色：用自来水缓缓冲洗至少3分钟以上,待干，勿用滤纸吸干,以免滤纸纤维污染涂片。
●第二种方法需要配制瑞氏-吉姆萨染液
1、试剂配制：
原料:A:瑞氏染粉0.38克；吉姆萨染粉.0.03克
甲醇100ml
磷酸盐缓冲液；
磷酸二氢钾 0.3g
磷酸氢二钠 0.2g 蒸馏水加至1000ml
配法：将A放入研钵中，加入少量B研磨，再加入少量B磨，再加入少量B磨……倒出，将未溶部分，继续加入B磨……>全溶，加入C，或中间加入C 亦可。
2、染色步骤：
滴数滴入玻片盖满标本，30秒，再加入双蒸水或PBS2-3倍染1-3分中，倾去染液，水洗……封片。
因为没有自己配制染液的经验，而买现成的瑞吉染液又太贵，所以被这些资料弄的晕头转向，所以一一进行了验证。
首先是完成吉姆萨母液的配制（瑞氏染液我们医院有），然后就是按照上文所说的进行复合染色。
接下来配制吉瑞复合染液，按照文中的说法进行染色。
使用两种染液先后复合染色效果比使用吉瑞复合染液染色的效果好。另单独使用吉姆萨染色，必须先用甲醇固定，否则用蒸馏水冲洗之后你会得到一张干净的玻片。
附：
磷酸盐缓冲液的配制
试剂： NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O
配制方法：配制时，常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
（1）0.2mol/L的 Na2HPO4；称取NaH2PO4.2H2O 31.2g(或 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
（2）0.2mol/L的 Na2HPO4：称取Na2HPO4.12H2O 71.632g（或 Na2HPO4·7H2O 53.6g或Na2HPO4·2H2O 35.6g）加重蒸水至1000ml溶解。
（3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.4～7.5）。若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。
0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7～8.0）
pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml) 0.2mol/L Na2HPO4(ml)
5.7 93.5 6.5
5.8 92.0 8.0
5.9 90.0 10.0
6.0 87.7 12.3
6.1 85.0 15.0
6.2 81.5 18.5
6.3 77.5 22.5
6.4 73.5 26.5
6.5 68.5 31.5
6.6 62.5 37.5
6.7 56.5 43.5
6.8 51.0 49.0
6.9 45.0 55.0
7.0 39.0 61.0
7.1 33.0 67.0
7.2 28.0 72.0
7.3 23.0 67.0
7.4 19.0 81.0
7.5 16.0 84.0
7.6 13.0 87.0
7.7 10.5 89.5
7.8 8.5 91.5
7.9 7.0 93.0
8.0 5.3 94.7