青岛卫生人才继续教育:龟鳖类应激反应及其防治措施

在集约化的生产条件下，尤其是温室养殖龟鳖中出现的高温、高密度、高污染的生态状况，易产生应激反应。龟鳖面临着远远超出其在自然生活场所可能发生的环境、生理和免疫等诸方面的应激因素。应激反应使龟鳖的生产性能下降、摄食减少，并对饲料转化率、生长速度、免疫反应、受精率、孵化率、成活率等产生很大的不利影响，给养殖户带来巨大经济损失。本文主要就龟鳖应激反应的原因、症状及防治措施作简要概述，为龟鳖养殖户和饲料生产企业提供一些解决问题的思路。

关键词：龟鳖  应激  防治

因龟鳖类具有独特的食用与药用价值，龟鳖类的养殖已蓬勃展开。但其自身胆小喜静，造成诸多应激因素都在不同程度上影响着它们的生存和繁殖。因此，解决龟鳖类动物的应激问题是龟鳖生产实践中的重要课题之一。目前，动物应激机理的研究与应用实践主要集中在哺乳动物、家禽和鱼类方面，对龟鳖类动物应激反应及其防治措施尚属起步阶段。

龟的应激反应在养殖过程比较常见，应激反应实际上就是龟鳖试图适应内外部环境的变化而产生的非特异性变化。所谓“环境胁迫”因素引起的龟病，就是龟受到外部环境变化的刺激产生的非特异性反应。一般将应激分为3个阶段：（1）动员阶段；（2）适应和抵抗阶段；（3）衰竭阶段。应激在第一阶段主要表现在肾上腺骨髓质激素和交感神经系统儿茶酚胺类释放突然增高，并动员体内能量释放；在第二阶段由肾上皮质释放大量糖皮质激素——皮质酮、皮质醇等，通过糖的异生代谢途径将营养贮备（碳水化合物、脂类和蛋白质）转化为葡萄糖，直至机体恢复或进入第三阶段；最后阶段龟以内贮备耗尽，或肾上皮质衰竭，无法产生足够的应激激素而夭折。

1  龟鳖应激反应的原因

实质上，应激是生态环境中，有害的外在胁迫因素产生的致病力超过生物体自身的调节能力，产生的结果。强烈的应激对龟鳖动物致病的打击，会引起无名和难以辨别的症状，导致应激的原因有很多，主要包括以下原因：

（1）天气突然变化，雷暴雨袭击，对正在晒背的龟鳖是致命的打击，每年都会引起大量龟鳖的应激；

（2）台风后雨水入侵温室，突然降温，致使温室龟鳖受应激停食；

（3）环境因子的改变，如异地引种，两地pH高度不一致，龟鳖苗种放养后产生应激；

（4）运输前喂食过多，以及在高温季节运输途中投放冰块降温，到达目的地后发现脱水并产生无名病症，其实是应激反应引起的；

（5）在养殖过程中，为了提高受精率对养殖对象进行冲水刺激，有时是降温、打扫卫生等需要，对龟头、龟背等直接冲水，受到刺激后，一般会发生应激反应，当然不会马上表现出来，过一段时间，疾病就会出现，显然是应激引起；

（6）换水是龟鳖养殖中经常要做的事，如果水温相差很大，就会发生问题，严重的会产生感冒、白眼、流鼻涕、急呼吸、头部反复上抬下垂等应激症状；

（7）龟鳖移入移出温室，没有渐进升温或降温，后果很严重，如果温差很大，可引起大量应激；龟鳖放养时，直接将龟鳖投放入水中，会导致应激，正确的做法是让龟鳖自行爬入水中；

（8）龟鳖苗放养时，水位太深，放入水体后的龟鳖容易发生呛水等应激；

（9）缺氧应激，在应激情况下，动物机体将调整代谢，动员体内的能量储备，来适应和对抗应激源的刺激；

（10）光照也会引起龟鳖应激，周显青等研究了光照变化对鳖的影响，发现光照强度显著影响中华鳖稚鳖的最大日摄食量。

2  应激对龟鳖的影响

2.1  应激对龟鳖动物繁殖的影响

传统观念认为，应激对繁殖有负面影响，特别是短期应激可能抑制繁殖的很多方面。囚禁使雄鳄龟的睾酮明显降低。锦龟对抓捕和操作处理非常敏感，激素水平在一天内急剧下降。对抓捕和囚禁应激，雄海龟的雄激素也显著下降。Huot等将囤养和野生的赫氏陆龟种群血浆性类固醇激素的变化进行了比较，结果表明，冬眠之后雄龟的黄体酮和睾酮逐渐上升，野生雄龟黄体酮的上升显著高于囤养雄龟；雌龟的孕酮在4～5月达到峰值，囤养龟的孕酮值也不如野生龟的变化显著。越来越多的研究支持皮质酮与繁殖之间的正向关系。一方面，繁殖开始时皮质酮基础水平升高，这种升高几乎可以持续数周至数月。但也有一些龟并不表现出繁殖季节皮质酮升高。另一方面，皮质酮的显著升高与繁殖行为对能量的需求相一致，这种皮质酮的增长是一般是几小时至几天。适度提高应激激素的水平似可通过动员能量储存而促进繁殖；相反，显著地激活下丘脑-垂体-肾上腺轴，极度地提高应激激素的水平可能会抑制繁殖。

2.2  应激对龟鳖类行为的影响

在应激源作用下，动物会对自身行为作出功能性调整，以适应应激环境。Bagatto 等将红耳侧线龟与星龟强迫淹没，星龟在水中的气体交换量提高了一倍，而红耳侧线龟没有变化，说明红耳侧线龟的无氧呼吸水平提高。二者经锻炼或强迫淹没处理，在空气中的气体交换率都大大增加。但星龟被强迫淹没后，在水面上的浮现时间明显延长，平均呼吸暂停时间显著减少，表明其在水面上的大部分时间都是为了通气呼吸。反映出星龟虽然能进行双呼吸（肺呼吸和在水中非肺呼吸），但在锻炼和强迫淹没下，更多地是在利用肺在空气中进行呼吸。红耳侧线龟虽只能依靠肺从空气中呼吸，但它能更好地从生理上进行调节以应对呼吸与代谢压力。Prassack等研究表明，温度对星龟与锦龟的潜水和气体交换行为具有重要的调节作用。

3  龟应激的防治方法

3.1  预防方法
       在哺乳动物和畜禽生产上，通常是合理规划设计养殖场、避免环境突变、应激驯化、选育抗应激品种、调控饲粮营养和添加抗应激剂等措施来缓解动物应激。借鉴在畜禽上面的方法应用到龟鳖抗应激上，主要是通过改善龟鳖养殖环境，采用勤排污、少换水，接种微生态制剂，适当使用消毒剂和分级饲养的方法，使水体等外部环境尽可能满足龟的生活、生长和繁殖的需要，促进龟鳖与外环境之间的生态平衡，减少应激反应的发生；增强龟鳖体质、加强营养，同时要改善龟鳖体内的微生态平衡也可以减少应激反应，主要方法是经常在饲料中按保健需要量添加维生素和微生态制剂，帮助益生菌增殖并长期保留在龟的消化道中，促进龟鳖体内的微生态平衡。

3.2   治疗方法

3.2.1 高剂量维生素C
       对已经出现应激反应的龟鳖，采取积极的治疗措施进行挽救。目前最有效的方法是服用VC，VC不仅具有防治坏血病的能力，更具有解缓应激的特异功效。机理是：VC参与肾上皮质激素合成，通过某些酶反应控制皮质酮的生成，降低其分泌速度。在急性应激反应状态下，VC调节降低血浆中的皮质酮水平。这一作用同时使得更多的体内贮存和代谢用于生产和免疫，减少应激时的不利影响和生产性能下降，维持免疫力。当龟鳖遭受病原微生物的感染时产生免疫应激，VC是维持胸腺网状细胞的功能所必需，VC缺乏时妨碍中性白细胞的趋化性和运动性，增加VC的剂量能显著增加血清免疫球蛋白。VC还能保护细胞免受噬菌作用，其间生成的氧化剂对其产生变性作用。应激造成免疫机能下降，白细胞的吞噬作用减弱，补充VC可使龟的免疫力提高，并使白细胞的吞噬能力恢复。在龟饲料中添加VC可降低一些应激因子产生的免疫抑制作用。龟鳖发生应激后对VC需要量增加。天然饲料中VC的含量低，在9 mg/kg下。因此要求在龟的配合饲料中添加VC 500-900 mg/kg。如果VC的含量比较高（90%以上），且稳定性好，预防龟鳖应激添加量为500 mg/kg 左右，治疗龟鳖应激添加量可提高到4g左右/kg。

3.2.2  高剂量维生素E

维生素 E在抗应激中也有一定作用。维生素 E能增强中华鳖对酸应激的抵抗能力，促进中华鳖血清补体C3和C4的合成，维持血清正常溶菌活性，且血清杀菌活力随添加量的加大而逐渐恢复。饲料中添加大于250 mg/kg维生素 E 对中华鳖血清皮质醇升高有抑制作用。维生素C和维生素E合用有明显的协同效应，能显著提高中华鳖血细胞的吞噬作用、血清溶菌活力和杀菌活力。对中华鳖补体C3的合成也有明显的协同作用，但二者合用对补体C4 却没有此影响。饲料中联合添加高剂量的VC（2500 mg/kg）和VE（250 mg/kg） ，能达到中华鳖的最佳免疫效果。

3.2.3  中草药黄芪

黄芪是中医常用益气药之一。近些年的研究表明，黄芪具有免疫调节和对抗不利环境等功能。它不仅能促进小鼠脾淋巴细胞的增殖，而且能增强大鼠的抗缺氧作用。龟鳖在养殖过程中，经常面临水质污染和温度波动等环境因素的变化，这对中华鳖的生长和存活极为不利。有鉴于此，周显青（2003）通过在试验饲料中添加一定量的黄芪，探讨黄芪对中华鳖免疫和抗应激能力的影响，以期通过黄芪的添加改善中华鳖的免疫和抗应激能力，提高中华鳖的生存能力。

试验证明，中草药黄芪能抑制酸应激引起中华鳖血清皮质醇含量的升高，缓和酸应激导致补体C3 和C4含量下降，还对酸应激导致的血细胞的吞噬能力的下降有对抗作用，提高中华鳖血清溶菌活力和杀菌活力。黄芪促进吞噬细胞吞噬作用的机制目前尚不清楚，但它的现代药理研究证实其具有降低自由基的产生和增加对自由基的净化能力。黄芪对酸应激导致的血细胞吞噬作用的下降的对抗作用，可能还与酸应激后皮质醇的变化有关。此外该研究还表明，黄芪对中华鳖血清溶菌活力和杀菌活力有明显的促进作用。

3.2.4  微量元素硒

刘至治等在基础饲料中添加 2.0 μg/g 亚硒酸钠、0.5 μg/g 硒酵母、 0.3% β-葡聚糖和0.25%果糖，投喂100 d 后，测定中华鳖红细胞数量、 红细胞 C₃b受体花环率、T淋巴细胞活性、E花环率的变化、红细胞天然免疫黏附肿瘤细胞花环率和白细胞吞噬活性的变化，发现在饲料中添加不同的免疫增强剂，能提高中华鳖血液中红细胞含量，增进免疫功能，提高机体对疾病的抵抗力。

3.2.5  谷氨酰胺

谷氨酰胺 （Glutamine， GLN）作为一种条件性必需氨基酸，除供多肽合成、 氧化供能外，还能促进机体免疫功能，维持肠道机能，提高机体抗应激、抗氧化和抗感染能力。温安详（2008）以中华鳖为实验对象，通过腹腔注射大肠杆菌内毒素（LPS）建立免疫应激模型，从机体神经内分泌、免疫功能和抗氧化能力等方面考察补充GLN对免疫应激时中华鳖的保护作用，为深入研究中华鳖免疫应激机理和GLN在生产实践上的应用提供基础依据。结果表明：注射LPS引起中华鳖产生了免疫应激反应，血浆中COR、TNF-α、L-1β、L-6、IgM、GSH-PX、MDA和肝脏组织PRO、GSH-PX、MDA含量在相应时段显著升高（p<0.05），而血浆和肝脏GSH含量显著降低（p<0.05）；补充GLN不仅缓解了COR、T NF-α、L-1β和L-6等的上升趋势，而且使非特异性免疫抑制剂（MDA）水平降低。LPS作为免疫原可引起中华鳖产生免疫应激反应，补充GLN可以缓解免疫应激，对中华鳖具有免疫保护作用。

总之，龟鳖应激是在实践中常见的，应激是龟鳖养殖的大敌，遇到应激，不要乱下药，必须先查到应激源，采取相应措施。对已经发生的应激病，可全池泼洒抗应激的药物。对应激病，最重要的是采取科学的操作方法，保持环境稳定，减少应激发生。