偶看新闻巢湖一中国际班:磷酸化蛋白提取试剂盒
来源：百度文库 编辑：偶看新闻 时间：2024/05/05 19:58:38
磷酸化蛋白提取试剂盒
产品组成：
产品组成
310021
310022
规格
50 assays
100 assays
磷酸化蛋白提取液
25ml
50ml
蛋白酶抑制剂混合物
100ul
200ul
储存条件：
蛋白酶抑制剂-20℃保存； 蛋白提取液2
有效期：
一年。
简介：
贝博磷酸化蛋白提取试剂盒适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取磷酸化蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒含有的独特配方能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。
试剂盒以外自备试剂和仪器
● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ● 冰箱，冰盒
使用方法：
细胞磷酸化蛋白提取：
1. 提取液制备：每500ul冷的蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 取5-10×106个细胞①，在4℃，1000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
3. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 每5×106个细胞中加入500ul冷的蛋白提取液，混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。
5. 在4℃，14000rpm条件下离心15分钟。
6. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到磷酸化蛋白。
7. 将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
组织磷酸化蛋白提取：
1. 提取液制备：每500ul冷的蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 取100mg组织样本剪碎，加入总蛋白提取液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体①。
3. 将组织匀浆吸入一预冷的干净离心管中，在4℃，10000rpm条件下离心5分钟。
4. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到磷酸化蛋白。
5. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。