没有盐焗粉怎么做:双元表达载体
来源:百度文库 编辑:偶看新闻 时间:2024/05/20 04:42:51
双元载体?
经常听说,农杆菌中的双元载体,它是怎么样的?是两个质粒吗,一个携带vir基因,一个携带T-DNA吗?与共整合载体(cointegrating vector) 相对
binary vector 指转化由两个载体来完成,相容。vir基因在实现T-DNA转移过程中,没有与T-DNA在同一质粒上。
小Ti质粒, 含T-DNA区,而缺少vir区的质粒,比如,pBIN19, pBI121
带vir区的质粒:主要功能是利用vir基因的作用,激活T-DNA 的转移。比如常用农杆菌菌株LBA4404,其中带有这种T-DNA缺失而保留vir的质粒pAL4404.
也就是说,在转化时农杆菌中是有两个质粒了?
另,野生型的Ti质粒是不是vir 和T-DNA都有了?
双元表达载体系统主要包括两个部分
一部分为卸甲Ti质粒,这类Ti质粒由于缺失了T-DNA 区域,完全丧失了致瘤作用,主要是提供Vir基因功能,激活处于反式位置上的T-DNA的转移。
另一部份是微型Ti质粒(Mini-Ti plasmid),它在T-DNA左右边界序列之间提供植株选择标记如NPTII基因以及Lac Z基因等。
双元载体系统的构建的原理是Ti质粒上的Vir基因可以反式激活T-DNA 的转移。与共整合载体所不同的是,它不依赖两个质粒之间的同源序列,不需要共整合过程就能在农杆菌内独立复制。
双元载体系统又叫二元载体系统,是指农杆菌中用于把T-DNA区域转入受体细胞的双质粒系统。其中一个质粒带有毒性基因,另一质粒带有改造过的T-DNA区域,用于携带外源基因
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