偶看新闻小米手机加密桌面文件:调节心情的5- 羟色胺
来源：百度文库 编辑：偶看新闻 时间：2024/05/03 21:07:15
五羟色胺（5HT），又称血清素，是一种重要的神经递质，它与人类的一系列行为问题有关，同时也与性格和情感障碍有关。
五羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）亦称血清素（Serotonin），最早是Rapport等人（1941）从血清中分离出来，命名为serotonin。不久，Erspamer和Boretti（1951）又从肠粘膜的嗜铬细胞发现肠胺。后来证实两者系同一化合物，鉴定为5-HT（图1）。5-HT在自然界广泛存在，除了动物的血液和肠道外，两栖类、马蜂、蝎子和蛇的毒液、蟾蜍的皮肤、鱼的唾液腺，以及菠萝和香蕉等多种植物中都存在含量不等的5-HT。人体内90%的5-HT存在于消化道粘膜，8%～10%在血小板，仅有1%～2%存在于中枢系统中。另有一部分存在于各种组织的肥大细胞中。由于血脑屏障的存在，血液中的5-HT很难进入中枢，因此中枢和外周神经的5-HT分属两个功能不同的独立系统。
作用
5-HT作为人体的内源性活性物质，与人体很多生理病理活动密切相关，作为神经递质的5-HT，在脑内可参与多种生理功能及病理状态的调节，如睡眠、摄食、体温、精神情感性疾病的调节。近年来的一些研究又表明，5-HT在脑中含量的变化，可以影响血脑屏障通透性的改变。
五羟色胺(5-HT)是参与调节胃肠道运动和分泌功能的重要神经递质, 95%来源于肠道黏膜层的嗜铬细胞. 胃肠道主要有5-HT1、5-HT2、5-HT3、5-HT4、5-HT7受体. 5-HT在发挥生理作用后通过肠黏膜上皮细胞膜上的5-HT转运体(SERT)再摄取至细胞内灭活. SERT基因5’启动子区存在多态性位点5-HTTLPR, 形成L/L、L/S、S/S三种等位基因类型, S型较L型转录效率降低.胃肠道通过肠神经系统自主、协调地完成蠕动、分泌反射. 肠嗜铬细胞释放5-HT, 激活黏膜下传入神经纤维, 通过肠神经系统, 调节局部的兴奋和抑制. 5-HT信号系统异常可导致胃肠道动力及分泌功能异常、内脏高敏感性, 与慢性便秘、肠易激综合征、腹泻及功能性消化不良等胃肠道功能性疾病密切相关. 在大脑内，五羟色胺能神经元大多位于桥脑和上脑干（尤其是该部位的缝际核）。蓝斑核的去甲肾上腺素能神经元对同一区域的某些神经元发出神经支配，五羟色胺能神经元也同样。更重要的是，5－HT和NE神经元在其胞体所处的某些区域以及神经末梢区互相加以神经支配。
提炼
五羟色胺是从非洲加纳籽提取的一种天然色胺酸，目前能稳定供货的有西安优速达，他们在加纳常驻采购人员，在工艺成熟质量稳定的前提下保证了我公司能常年稳定供应加纳籽提取物。产品也已经受到客户的一致好评。提取于非洲的植物加纳种子，通过自然地提高血清素的水平，增加人体血液中复合胺的生成。5-羟基色氨酸已被欧美各大保健品公司广泛应用. 【产品名称】：5-HTP、5-羟基色氨酸、加纳籽提取物 、L-5-HTP。
相关信息
【英文名称】：5-hydroxytryptophan
【产品规格】：10%~99% 5-HTP( HPLC外标法).
【分 子 式】：C11H12N2O3
【分 子 量】：220.23
【CAS No】： 56-69-9
【外 观】：类白色至白色精细粉末
【物理性质】：微味略带咸涩,5-HTP不易溶于水、熔点 270℃、旋光度-30°
【产品来源】：加纳籽为豆科灌木植物加纳谷物Griffonia simplicifolia的干燥种子， 种子长圆形，长约1.5厘米，宽约1厘米，种皮呈黑色，有皱纹，胚乳黄绿色，略带豆香味，干粒果实重约80克。
【产 地】：野生于非洲加纳、象牙海岸和多哥等西非国家。
【采收时间 】：12月到次年2月。
临床应用
1. 抗忧郁、镇定剂：5-HTP是人体内一种贺尔蒙叫做serotonin的前驱物质,可以帮助人体内这种贺尔蒙的生产,使自己体内达到平衡.5-羟色氨酸是一个自然氨基的酸性物质在许多饮食所含的蛋白质中可以找到，5-羟色氨酸可增强5-羟色氨的活动力。5-羟色氨是脑部分泌的一种荷尔蒙，会影响我们的情绪、睡眠和食欲，造成脑中的血清素不平衡时需5-羟色氨酸来维持身体处于正常状态。因此含量太低则容易忧郁、焦虑及睡眠失调。5-羟色氨酸它可增加脑细胞的血清素制造量，进而提升5-羟色氨的含量。
5-羟色氨酸在人体中会制造出血清素,对于正常的神经的重要物质和脑的功能有帮助.血清素可以帮助睡眠.也可有效的控制疼痛,可以治疗忧郁症。
在动物研究的基础上，这些5－HT和NE神经元在抗抑郁剂的作用机制中起着关键作用，这是抗抑郁剂（如米氮平）对5－HT和NE受体造成脱敏、下调和直接拮抗作用的结果，这些作用负向影响动作电位的放电，并且抑制神经递质的合成和释放。因此，大脑内去甲肾上腺素能和五羟色胺能系统的功能可以增强，理论上而言，这可导致抑郁症状的缓解。
2. 减缓压力和改善睡眠方面：5-羟色氨酸也成功地被拿来治疗睡眠失调。由于血清素是褪黑激素-一种调节睡眠和清醒周期的天然荷尔蒙-的前身，因此当血清素的含量提高时，褪黑激素的含量也就增加，使得睡眠更为香甜。5-羟色氨酸和SSRI的作用类似，但后者有不利:一，抗忧郁处方药贵了许多；二，处方药常会引起一些不良的副作用，包括了口干、焦虑及丧失性欲。
3. 减肥：可以有效控制食欲，提高饱食中枢的敏感性，在减肥过程的饮食控制中，降低饥饿感，使减肥过程更轻松容易达成，是当前流行的减肥食品辅助剂。对想减肥的人是一大福音。
4. 除具有传统的医药功能和抗忧郁症外,还具有减肥,戒瘾,改善睡眠,缓和经前综合症(PMS),治疗偏头疼等功能。
人5羟色胺(5-HT)ELISA Kit
点击浏览大图
公司名称：
上海希美生物科技有限公司
发布日期：
2010-1-3
所 在 地：
上海市
生产地址：
美国
已获点击：
150
简单介绍：
产品名称：人5羟色胺(5-HT)ELISA Kit
英文名称：Human 5-Hydroxytryptamine,5HT ELISA Kit
产品分类：人神经系统酶联免疫吸附测定试剂盒[ELISA Kit for Human nervous system]
检验方法：ELISA
包 装：96T
【详细说明】
人5羟色胺(5-HT)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!
预期应用
ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中催乳素含量。
实验原理
用纯化的催乳素抗体包被微孔板，制成固相载体，往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的催乳素抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的催乳素呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度( 值)，计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1、 酶标板：一块(96孔)
2、 标准品(冻干品)： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至1ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为6,000 pg/ml，然后做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)，分别配制成6,000 pg/ml，3,000 pg/ml，1,500 pg/ml，750 pg/ml，375 pg/ml，187.5 pg/ml，93.75 pg/ml，样品稀释液直接作为空白孔 0 pg/ml。如配制3,000 pg/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml )6,000 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
6、 检测溶液A：1×120 /瓶(1:100)。临用前以检测稀释液A 1:100稀释(如：10 检测溶液A / 990 检测稀释液A)，充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100 /孔)，实际配制时应多配制 0.1-0.2ml。
7、 检测溶液B：1×120 /瓶(1:100)。临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8、 底物溶液：1×10ml/瓶。
9、 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液：1×10ml/瓶(2 mol/L H2SO4)。
11、覆膜：5张
12、使用说明书：1份
自备物品
1、 酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2、 微量加液器及吸头，EP管
3、 蒸馏水或去离子水，滤纸
标本的采集及保存
1、 血清：全血标本请于室温放置2小时或4 过夜后于1000 g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20 或-80 保存，但应避免反复冻融。
2、 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于 1000 g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20 或-80 保存，但应避免反复冻融。
3、 其它生物标本：请1000 g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20 或-80 保 存，但应避免反复冻融。
4、 样本处理：血清或血浆标本推荐稀释100倍，如：稀释100倍，取10uL血清或血浆加入990uL样品稀释液。标本使用0.1 M 的PBS稀释( PH=7.0-7.2)。
注：以上标本均应密封保存，4 保存应小于1周，-20 不应超过1个月，-80 不应超过2个月；标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
操作步骤
实验开始前，各试剂均应平衡至室温，试剂不能直接在37 溶解；试剂或样品配制时，均需充分混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1、 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液 100 ，余孔分别加标准品或待测样品100 ，注意不要有气泡，加样 时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37 温育2小时。为保证实验结果有效
性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2、 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100 (临用前配制)，酶标板加上覆膜，37 温育1小时。
3、 弃去孔内液体，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分钟，大约400 /每孔，甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4、 每孔加检测溶液B工作液(临用前配制)100 ，加上覆膜，37 温育1小时。
5、 弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。
6、 每孔加底物溶液90 ，酶标板加上覆膜37 避光显色(反应时间控制在15-30分钟，当标准孔的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显时，即可终止)。
7、 每孔加终止溶液50 ，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物 液的加入顺序相同。
8、 立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度( 值)。
注：
1、 试剂准备：所有试剂在使用前应平衡至室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2、 加样：加样或加试剂时，第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 “预温育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)最好控制在10分钟内。推荐设置复孔进行实验。
3、 温育：为防止样品蒸发，实验时将加上盖或覆膜的酶标板置于湿盒内，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态；同时应严格遵守给定的温育时间和温度。
4、 洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响最后的酶标仪读数。
5、 试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配制使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请精确 配制标准品及工作液，尽量不要微量配制(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10 )，以避免由于不准确稀 释而造成浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液。
6、 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7、 底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
洗板方法
1、 手工洗板方法：将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内，浸泡1-2分钟，吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体，在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；根据需要，重复此过程数次。
2、 自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
特异性
本试剂盒可同时检测重组或天然的人催乳素，且与其它相关蛋白无交叉反应。
计算
各标准品及样本 值扣除空白孔 值后作图(七点图)，如设置复孔，则 应取其平均值计算。以标准品的浓度为纵坐标(对数坐标)， 值为横坐标(对数坐标)，在对数坐标纸上绘出标准曲线。推荐使用专业制作曲线软件进行分析，如 curve expert 1.3，根据样品 值，由标准曲线查出相应的浓度，乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 值计算出标准曲线的回归方程式，将样品的 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
检测范围：93.75 pg/ml - 6,000 pg/ml，绘制标准曲线请取用以下浓度值：6,000 pg/ml，3,000 pg/ml，1,500 pg/ml，750 pg/ml，375 pg/ml，187.5 pg/ml，93.75 pg/ml。
最低检测限：23.4 pg/ml
说明
1. 在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染，试剂避免受到微生物的污染，因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
2. 小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 “预孵育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。而且，洗涤不充分将影响试验结果。
3. 试剂盒保存：部分试剂保存于-20℃，部分试剂保存于2-8℃，具体以标签上的标示为准。
4. 浓洗涤液会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
5. 刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
6. 中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
7. 所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。
8. 有效期：6个月http://www.chem17.com/st140211/product_1923710.html
五羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）亦称血清素（Serotonin），最早是Rapport等人（1941）从血清中分离出来，命名为serotonin。不久，Erspamer和Boretti（1951）又从肠粘膜的嗜铬细胞发现肠胺。后来证实两者系同一化合物，鉴定为5-HT（图1）。5-HT在自然界广泛存在，除了动物的血液和肠道外，两栖类、马蜂、蝎子和蛇的毒液、蟾蜍的皮肤、鱼的唾液腺，以及菠萝和香蕉等多种植物中都存在含量不等的5-HT。人体内90%的5-HT存在于消化道粘膜，8%～10%在血小板，仅有1%～2%存在于中枢系统中。另有一部分存在于各种组织的肥大细胞中。由于血脑屏障的存在，血液中的5-HT很难进入中枢，因此中枢和外周神经的5-HT分属两个功能不同的独立系统。
作用
5-HT作为人体的内源性活性物质，与人体很多生理病理活动密切相关，作为神经递质的5-HT，在脑内可参与多种生理功能及病理状态的调节，如睡眠、摄食、体温、精神情感性疾病的调节。近年来的一些研究又表明，5-HT在脑中含量的变化，可以影响血脑屏障通透性的改变。
五羟色胺(5-HT)是参与调节胃肠道运动和分泌功能的重要神经递质, 95%来源于肠道黏膜层的嗜铬细胞. 胃肠道主要有5-HT1、5-HT2、5-HT3、5-HT4、5-HT7受体. 5-HT在发挥生理作用后通过肠黏膜上皮细胞膜上的5-HT转运体(SERT)再摄取至细胞内灭活. SERT基因5’启动子区存在多态性位点5-HTTLPR, 形成L/L、L/S、S/S三种等位基因类型, S型较L型转录效率降低.胃肠道通过肠神经系统自主、协调地完成蠕动、分泌反射. 肠嗜铬细胞释放5-HT, 激活黏膜下传入神经纤维, 通过肠神经系统, 调节局部的兴奋和抑制. 5-HT信号系统异常可导致胃肠道动力及分泌功能异常、内脏高敏感性, 与慢性便秘、肠易激综合征、腹泻及功能性消化不良等胃肠道功能性疾病密切相关. 在大脑内，五羟色胺能神经元大多位于桥脑和上脑干（尤其是该部位的缝际核）。蓝斑核的去甲肾上腺素能神经元对同一区域的某些神经元发出神经支配，五羟色胺能神经元也同样。更重要的是，5－HT和NE神经元在其胞体所处的某些区域以及神经末梢区互相加以神经支配。
提炼
五羟色胺是从非洲加纳籽提取的一种天然色胺酸，目前能稳定供货的有西安优速达，他们在加纳常驻采购人员，在工艺成熟质量稳定的前提下保证了我公司能常年稳定供应加纳籽提取物。产品也已经受到客户的一致好评。提取于非洲的植物加纳种子，通过自然地提高血清素的水平，增加人体血液中复合胺的生成。5-羟基色氨酸已被欧美各大保健品公司广泛应用. 【产品名称】：5-HTP、5-羟基色氨酸、加纳籽提取物 、L-5-HTP。
相关信息
【英文名称】：5-hydroxytryptophan
【产品规格】：10%~99% 5-HTP( HPLC外标法).
【分 子 式】：C11H12N2O3
【分 子 量】：220.23
【CAS No】： 56-69-9
【外 观】：类白色至白色精细粉末
【物理性质】：微味略带咸涩,5-HTP不易溶于水、熔点 270℃、旋光度-30°
【产品来源】：加纳籽为豆科灌木植物加纳谷物Griffonia simplicifolia的干燥种子， 种子长圆形，长约1.5厘米，宽约1厘米，种皮呈黑色，有皱纹，胚乳黄绿色，略带豆香味，干粒果实重约80克。
【产 地】：野生于非洲加纳、象牙海岸和多哥等西非国家。
【采收时间 】：12月到次年2月。
临床应用
1. 抗忧郁、镇定剂：5-HTP是人体内一种贺尔蒙叫做serotonin的前驱物质,可以帮助人体内这种贺尔蒙的生产,使自己体内达到平衡.5-羟色氨酸是一个自然氨基的酸性物质在许多饮食所含的蛋白质中可以找到，5-羟色氨酸可增强5-羟色氨的活动力。5-羟色氨是脑部分泌的一种荷尔蒙，会影响我们的情绪、睡眠和食欲，造成脑中的血清素不平衡时需5-羟色氨酸来维持身体处于正常状态。因此含量太低则容易忧郁、焦虑及睡眠失调。5-羟色氨酸它可增加脑细胞的血清素制造量，进而提升5-羟色氨的含量。
5-羟色氨酸在人体中会制造出血清素,对于正常的神经的重要物质和脑的功能有帮助.血清素可以帮助睡眠.也可有效的控制疼痛,可以治疗忧郁症。
在动物研究的基础上，这些5－HT和NE神经元在抗抑郁剂的作用机制中起着关键作用，这是抗抑郁剂（如米氮平）对5－HT和NE受体造成脱敏、下调和直接拮抗作用的结果，这些作用负向影响动作电位的放电，并且抑制神经递质的合成和释放。因此，大脑内去甲肾上腺素能和五羟色胺能系统的功能可以增强，理论上而言，这可导致抑郁症状的缓解。
2. 减缓压力和改善睡眠方面：5-羟色氨酸也成功地被拿来治疗睡眠失调。由于血清素是褪黑激素-一种调节睡眠和清醒周期的天然荷尔蒙-的前身，因此当血清素的含量提高时，褪黑激素的含量也就增加，使得睡眠更为香甜。5-羟色氨酸和SSRI的作用类似，但后者有不利:一，抗忧郁处方药贵了许多；二，处方药常会引起一些不良的副作用，包括了口干、焦虑及丧失性欲。
3. 减肥：可以有效控制食欲，提高饱食中枢的敏感性，在减肥过程的饮食控制中，降低饥饿感，使减肥过程更轻松容易达成，是当前流行的减肥食品辅助剂。对想减肥的人是一大福音。
4. 除具有传统的医药功能和抗忧郁症外,还具有减肥,戒瘾,改善睡眠,缓和经前综合症(PMS),治疗偏头疼等功能。
人5羟色胺(5-HT)ELISA Kit
点击浏览大图
公司名称：
上海希美生物科技有限公司
发布日期：
2010-1-3
所 在 地：
上海市
生产地址：
美国
已获点击：
150
简单介绍：
产品名称：人5羟色胺(5-HT)ELISA Kit
英文名称：Human 5-Hydroxytryptamine,5HT ELISA Kit
产品分类：人神经系统酶联免疫吸附测定试剂盒[ELISA Kit for Human nervous system]
检验方法：ELISA
包 装：96T
【详细说明】
人5羟色胺(5-HT)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!
预期应用
ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中催乳素含量。
实验原理
用纯化的催乳素抗体包被微孔板，制成固相载体，往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的催乳素抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的催乳素呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度( 值)，计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1、 酶标板：一块(96孔)
2、 标准品(冻干品)： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至1ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为6,000 pg/ml，然后做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)，分别配制成6,000 pg/ml，3,000 pg/ml，1,500 pg/ml，750 pg/ml，375 pg/ml，187.5 pg/ml，93.75 pg/ml，样品稀释液直接作为空白孔 0 pg/ml。如配制3,000 pg/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml )6,000 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
6、 检测溶液A：1×120 /瓶(1:100)。临用前以检测稀释液A 1:100稀释(如：10 检测溶液A / 990 检测稀释液A)，充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100 /孔)，实际配制时应多配制 0.1-0.2ml。
7、 检测溶液B：1×120 /瓶(1:100)。临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8、 底物溶液：1×10ml/瓶。
9、 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液：1×10ml/瓶(2 mol/L H2SO4)。
11、覆膜：5张
12、使用说明书：1份
自备物品
1、 酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2、 微量加液器及吸头，EP管
3、 蒸馏水或去离子水，滤纸
标本的采集及保存
1、 血清：全血标本请于室温放置2小时或4 过夜后于1000 g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20 或-80 保存，但应避免反复冻融。
2、 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于 1000 g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20 或-80 保存，但应避免反复冻融。
3、 其它生物标本：请1000 g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20 或-80 保 存，但应避免反复冻融。
4、 样本处理：血清或血浆标本推荐稀释100倍，如：稀释100倍，取10uL血清或血浆加入990uL样品稀释液。标本使用0.1 M 的PBS稀释( PH=7.0-7.2)。
注：以上标本均应密封保存，4 保存应小于1周，-20 不应超过1个月，-80 不应超过2个月；标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
操作步骤
实验开始前，各试剂均应平衡至室温，试剂不能直接在37 溶解；试剂或样品配制时，均需充分混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1、 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液 100 ，余孔分别加标准品或待测样品100 ，注意不要有气泡，加样 时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37 温育2小时。为保证实验结果有效
性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2、 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100 (临用前配制)，酶标板加上覆膜，37 温育1小时。
3、 弃去孔内液体，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分钟，大约400 /每孔，甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4、 每孔加检测溶液B工作液(临用前配制)100 ，加上覆膜，37 温育1小时。
5、 弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。
6、 每孔加底物溶液90 ，酶标板加上覆膜37 避光显色(反应时间控制在15-30分钟，当标准孔的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显时，即可终止)。
7、 每孔加终止溶液50 ，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物 液的加入顺序相同。
8、 立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度( 值)。
注：
1、 试剂准备：所有试剂在使用前应平衡至室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2、 加样：加样或加试剂时，第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 “预温育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)最好控制在10分钟内。推荐设置复孔进行实验。
3、 温育：为防止样品蒸发，实验时将加上盖或覆膜的酶标板置于湿盒内，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态；同时应严格遵守给定的温育时间和温度。
4、 洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响最后的酶标仪读数。
5、 试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配制使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请精确 配制标准品及工作液，尽量不要微量配制(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10 )，以避免由于不准确稀 释而造成浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液。
6、 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7、 底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
洗板方法
1、 手工洗板方法：将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内，浸泡1-2分钟，吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体，在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；根据需要，重复此过程数次。
2、 自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
特异性
本试剂盒可同时检测重组或天然的人催乳素，且与其它相关蛋白无交叉反应。
计算
各标准品及样本 值扣除空白孔 值后作图(七点图)，如设置复孔，则 应取其平均值计算。以标准品的浓度为纵坐标(对数坐标)， 值为横坐标(对数坐标)，在对数坐标纸上绘出标准曲线。推荐使用专业制作曲线软件进行分析，如 curve expert 1.3，根据样品 值，由标准曲线查出相应的浓度，乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 值计算出标准曲线的回归方程式，将样品的 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
检测范围：93.75 pg/ml - 6,000 pg/ml，绘制标准曲线请取用以下浓度值：6,000 pg/ml，3,000 pg/ml，1,500 pg/ml，750 pg/ml，375 pg/ml，187.5 pg/ml，93.75 pg/ml。
最低检测限：23.4 pg/ml
说明
1. 在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染，试剂避免受到微生物的污染，因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
2. 小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 “预孵育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。而且，洗涤不充分将影响试验结果。
3. 试剂盒保存：部分试剂保存于-20℃，部分试剂保存于2-8℃，具体以标签上的标示为准。
4. 浓洗涤液会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
5. 刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
6. 中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
7. 所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。
8. 有效期：6个月http://www.chem17.com/st140211/product_1923710.html