神武芙蓉仙子图鉴:四神丸化裁治疗溃疡性结肠炎的对比性实验研究

　　3.1  病理学观察及结肠损伤评分见表1。肉眼下可见模型组结肠黏膜明显充血、水肿，中到重度糜烂和多个溃疡，溃疡呈圆形或椭圆形，底部干净，或可见少量淡黄色覆盖物，边缘充血水肿；镜下可见黏膜糜烂脱落、充血水肿，炎症细胞浸润，形成多个溃疡缺损，结肠指数、结肠损伤评分及病理组织学评分明显高于正常组（P＜0.01）；各治疗组亦可见少量充血水肿和部分结肠可见轻度糜烂和溃疡，镜下可见溃疡数目明显减少，底部可见纤维结缔组织增生，充血水肿明显减轻，伴少量炎症细胞浸润，与模型组比较结肠指数、结肠损伤评分及病理组织学评分明显下降并具有统计学意义（P＜0.05）。同时，四神丸与加味四神丸两组之间比较无显著性差异，提示四神丸及加味四神丸均可明显缓解结肠损伤局部充血水肿，减轻炎症细胞浸润程度，减少溃疡数目，促进结肠上皮损伤修复、溃疡愈合。表1  结肠黏膜损伤修复情况（略）与正常组比较，★★P＜0.01；与模型组比较，△△P＜0.01，△P＜0.05；与四神丸组比较,*P＜0.05；n=10

　　3.2  结肠上皮细胞凋亡情况见表1。结肠上皮细胞凋亡水平可见模型组较正常组明显升高（P＜0.01），而各治疗组与模型组比较，其结肠上皮细胞凋亡率明显下降（P＜0.01或P＜0.05）。同时加味四神丸组与四神丸之间比较，加味四神丸降低结肠上皮细胞凋亡率明显优于四神丸(P＜0.05），提示四神丸及加味四神丸均可明显抑制结肠上皮细胞凋亡速度，减轻损伤程度，且加味四神丸优于四神丸组。

　　3.3  结肠局部细胞因子表达水平见表2。结肠局部组织匀浆细胞因子水平可见，模型组TNF-α，PAF表达水平明显高于正常组（P＜0.01或P＜0.05），而IL-10，TGF-β表达水平均明显低于正常组，给药10 d后，与模型组比较，四神丸组明显升高TGF-β水平外（P＜0.01），对TNF-α，PAF，IL-10表达作用不明显，或仅有作用趋势，而无统计学意义。而加味四神丸与模型组比较，降低TNF-α，PAF表达、升高TGF-β水平较明显（P＜0.01或P＜0.05），同时，四神丸与加味四神丸之间比较，可见加味四神丸降低TNF-α，PAF表达，升高IL-10水平明显优于四神丸组（P＜0.05），但升高TGF-β水平则无统计学意义。

　　4  讨论

    溃疡性结肠炎是一种不明病因的炎症性结肠疾病。宏观上，几乎各种证型都不同程度存在着淤血状态；微观上，均有血液流变学的改变［7］。王长洪提出UC病人不论病史长短、症状轻重、缓解或发作，主诉均为腹痛、腹泻、黏液脓血便，结肠镜检查黏膜充血、水肿，甚至出现糜烂、溃疡、出血，肠黏膜活检病理组织学常见大量血栓形成，均与中医的“血淤”之证吻合，强调UC总的病机特点应归纳为“淤滞”，病理特征是虚中夹实，并贯穿于疾病的全过程［8］。根据久病成虚和久病成淤的理论，UC日久，其病机发展以脾肾亏虚为本的病理状态，同时兼夹淤血凝滞，故而治疗上可见温补脾肾法和活血化淤法联合使用。如何胜国等［3］采用温阳活血法治疗非特异性UC患者34例，结果有效率为97.06%，效果显著。表2  结肠组织匀浆细胞因子的表达（略）与正常组比较，★★P＜0.01，★P＜0.01；与模型组比较，△△P＜0.01，△P＜0.05；与四神丸组比较,*P＜0.05；n=10

    现代研究表明，溃疡性结肠炎患者体内存在血液高凝状态［9］，提示高凝状态的形成可能是UC的重要发病特征之一。溃疡性结肠炎患者外周血和患病局部均存在血液浓稠性、聚集性、黏滞性增高，血液循环减慢，导致肠黏膜血液灌流减少，细胞缺血、缺氧，进而引起肠黏膜组织损伤［7］。高凝状态的形成与PAF（Platelet Activating Factor，PFA）的活化有密切的关系，PAF在溃疡性结肠炎的发病过程中起关键性作用，可潜在性刺激前炎症因子的产生和增加炎症细胞［10］。Ko等［11］研究发现，PAF与靶细胞表面受体结合后激活核因子NF-κB而上调IL-1，TNF-α的合成和分泌。IL-1，TNF-α作为一级炎症因子，又刺激多种炎症细胞合成PAF。PAF还可显著性促进CD4T细胞增殖，调节T淋巴细胞亚群之间的平衡，趋化T淋巴细胞，且可降低SIgA水平，损害肠黏膜的免疫屏障功能［12］。CD4T细胞已经被确定作为溃疡性结肠炎的致病性T细胞，它是通过Th1或Th2通路引发肠道炎症的［13］。前者能产生大量的IL-2，IFN-γ等；后者Th2细胞则可产生IL-4，IL-5等细胞因子，从而活化B细胞，产生中和抗体和IgE。血小板活化因子激活后，释放或促进大量炎症因子的分泌，引起血小板的黏附和聚集，或作为炎症介质，或调节免疫功能，直接或间接参与肠道黏膜的损伤，最终引起UC患者体内血液的高凝状态的形成，因此，PAF广泛的参与了溃疡性结肠炎的多个发病关键环节，形成以血小板活化因子为中心，以炎症介质、免疫异常为网络，导致高凝状态，引起结肠局部血管内皮损伤，结肠局部组织细胞缺血缺氧，最终导致结肠黏膜变性坏死，形成溃疡。

    本实验中，模型组TNF-α、PAF表达水平明显高于正常组，而IL-10、TGF-β表达水平均明显低于正常组，与相关报道较一致。加味四神丸则可显著降低TNF-α、PAF表达、升高TGF-β水平较明显，表明活血理肠丸可能抑制血小板活化因子的活化，进而调节抗炎因子和促炎因子平衡，减轻炎症损伤，促进黏膜修复、溃疡愈合。而四神丸则明显升高TGF-β表达水平，表明四神丸可有效治疗溃疡性结肠炎的途径可能是通过升高TGF-β表达水平，由此抑制单核细胞及T细胞等细胞的活性，减少TNF-a等促炎因子的分泌，促进上皮细胞修复，减少上皮细胞凋亡的速度，加速溃疡愈合。二者均有效治疗溃疡性结肠炎，但二者作用的可能机制不同，临床使用时宜根据患者血凝状态程度和辨证论治加以选择。